ტესტის შეჯამება და ახსნა
მალარია არის კოღოებით გამოწვეული, ჰემოლიზური, ფებრილური დაავადება, რომელიც აინფიცირებს 200 მილიონზე მეტ ადამიანს და კლავს წელიწადში 1 მილიონზე მეტ ადამიანს.მას იწვევს პლაზმოდიუმის ოთხი სახეობა: P. falciparum, P. vivax, P. ovale და P. malariae.ეს პლაზმოდია აინფიცირებს და ანადგურებს ადამიანის ერითროციტებს, იწვევს შემცივნებას, ცხელებას, ანემიას და სპლენომეგალიას.P. falciparum იწვევს უფრო მძიმე დაავადებებს, ვიდრე სხვა პლაზმოდიური სახეობები და განაპირობებს მალარიით სიკვდილიანობას.P. falciparum და P. vivax ყველაზე გავრცელებული პათოგენებია, თუმცა სახეობების გავრცელების მნიშვნელოვანი გეოგრაფიული ცვალებადობაა.
ტრადიციულად, მალარიის დიაგნოსტირება ხდება ორგანიზმების დემონსტრირებით გიემზას შეღებილ პერიფერიულ სისხლის სქელ ნაცხებზე, ხოლო პლაზმოდიუმის სხვადასხვა სახეობა გამოირჩევა ინფიცირებულ ერითროციტებში გამოჩენით.ტექნიკას შეუძლია ზუსტი და სანდო დიაგნოსტიკა, მაგრამ მხოლოდ მაშინ, როდესაც შესრულებულია გამოცდილი მიკროსკოპების მიერ განსაზღვრული პროტოკოლების გამოყენებით, რაც წარმოადგენს მთავარ დაბრკოლებას მსოფლიოს შორეულ და ღარიბ ტერიტორიებზე.
მალარიის Pf/Pv Ag სწრაფი ტესტი შემუშავებულია ამ დაბრკოლებების გადასაჭრელად.ის იყენებს ანტისხეულებს სპეციფიკურ P. falciparum Histidine Rich Protein-II (pHRP-II) და P. vivax ლაქტატდეჰიდროგენაზას (Pv-LDH) მიმართ, რათა ერთდროულად აღმოაჩინოს და განასხვავოს ინფექცია P. falciparum-ით და P. vivax-ით.ტესტის ჩატარება შესაძლებელია არატრენინგის ან მინიმალური კვალიფიკაციის მქონე პერსონალის მიერ, ლაბორატორიული აღჭურვილობის გარეშე
პრინციპი
მალარიის Pf/Pv Ag სწრაფი ტესტი არის გვერდითი ნაკადის ქრომატოგრაფიული იმუნოანალიზი.ზოლის ტესტის კომპონენტები შედგება: 1) შინდისფერი ფერის კონიუგატური ბალიშისგან, რომელიც შეიცავს თაგვის ანტი-Pv-LDH ანტისხეულს, რომელიც შერწყმულია კოლოიდური ოქროთი (Pv-LDH-ოქროს კონიუგატები) და თაგვის ანტი-pHRP-II ანტისხეულები, რომლებიც შერწყმულია კოლოიდური ოქროთი (pHRP-II-ოქროს ზოლებიანი ზოლები, შეიცავს ორ უჯრედოვან გარსს. v და Pf ზოლები) და საკონტროლო ზოლი (C band).Pv ზოლი წინასწარ დაფარულია თაგვის სხვა ანტი-Pv-LDH სპეციფიური ანტისხეულით Pv ინფექციის გამოსავლენად, Pf ზოლი დაფარულია პოლიკლონური ანტი-pHRP-II ანტისხეულებით Pf ინფექციის გამოსავლენად, ხოლო C ზოლი დაფარულია თხის საწინააღმდეგო თაგვის IgG-ით.
ანალიზის დროს, სისხლის ნიმუშის ადექვატური მოცულობა ნაწილდება სატესტო კასეტის ნიმუშში (S), ბუფერულ ჭაბურღილს (B) ემატება ლიზისის ბუფერი.ბუფერი შეიცავს სარეცხ საშუალებას, რომელიც ასუფთავებს სისხლის წითელ უჯრედებს და ათავისუფლებს სხვადასხვა ანტიგენებს, რომლებიც კაპილარული მოქმედებით მიგრირებენ კასეტაში მოთავსებულ ზოლზე.Pv-LDH თუ წარმოდგენილია ნიმუშში, დაუკავშირდება Pv-LDH-ოქროს კონიუგატებს.შემდეგ იმუნოკომპლექსი იჭერს მემბრანას წინასწარ დაფარული ანტი-Pv-LDH ანტისხეულით, რაც ქმნის შინდისფერი ფერის Pv ზოლს, რაც მიუთითებს Pv ტესტის დადებით შედეგზე.ალტერნატიულად, pHRP-II თუ წარმოდგენილია ნიმუშში, დაუკავშირდება pHRP-II-ოქროს კონიუგატებს.შემდეგ იმუნოკომპლექსი იჭერს მემბრანას წინასწარ დაფარული ანტი-pHRP-II ანტისხეულებით, რაც ქმნის შინდისფერი ფერის Pf ზოლს, რაც მიუთითებს Pf ტესტის დადებით შედეგზე.ტესტის ზოლების არარსებობა უარყოფით შედეგზე მიუთითებს.ტესტი შეიცავს შიდა კონტროლს (C ზოლს), რომელიც უნდა გამოავლინოს თხის ანტი-თაგვის IgG/თაგვის IgG (ანტი-Pv-LDH და ანტი-pHRPII) ოქროს კონიუგატების იმუნოკომპლექსის შინდისფერი ფერის ზოლი, მიუხედავად ფერის განვითარებისა რომელიმე ტესტის ზოლზე.წინააღმდეგ შემთხვევაში, ტესტის შედეგი არასწორია და ნიმუში ხელახლა უნდა შემოწმდეს სხვა მოწყობილობით.
