ტესტის შეჯამება და ახსნა
მალარია არის კოღოებით გამოწვეული, ჰემოლიზური, ფებრილური დაავადება, რომელიც აინფიცირებს 200 მილიონზე მეტ ადამიანს და კლავს წელიწადში 1 მილიონზე მეტ ადამიანს.მას იწვევს პლაზმოდიუმის ოთხი სახეობა: P. falciparum, P. vivax, P. ovale და P. malariae.ეს პლაზმოდია აინფიცირებს და ანადგურებს ადამიანის ერითროციტებს, იწვევს შემცივნებას, ცხელებას, ანემიას და სპლენომეგალიას.P. falciparum იწვევს უფრო მძიმე დაავადებებს, ვიდრე სხვა პლაზმოდიური სახეობები და განაპირობებს მალარიით სიკვდილიანობას.P. falciparum და P. vivax ყველაზე გავრცელებული პათოგენებია, თუმცა სახეობების გავრცელების მნიშვნელოვანი გეოგრაფიული ცვალებადობაა.
ტრადიციულად, მალარიის დიაგნოსტირება ხდება ორგანიზმების დემონსტრირებით გიემზას შეღებილ პერიფერიულ სისხლის სქელ ნაცხებზე, ხოლო პლაზმოდიუმის სხვადასხვა სახეობა გამოირჩევა ინფიცირებულ ერითროციტებში გამოჩენით1.ტექნიკას შეუძლია ზუსტი და სანდო დიაგნოსტიკა, მაგრამ მხოლოდ მაშინ, როდესაც შესრულებულია გამოცდილი მიკროსკოპების მიერ განსაზღვრული პროტოკოლების გამოყენებით2, რაც წარმოადგენს ძირითად დაბრკოლებებს მსოფლიოს შორეულ და ღარიბ ტერიტორიებზე.
მალარიის Pf/Pan ანტიგენის სწრაფი ტესტის ნაკრები შექმნილია ამ დაბრკოლებების გადასაჭრელად.ტესტი იყენებს წყვილ მონოკლონურ და პოლიკლონალურ ანტისხეულებს P. falciparum სპეციფიკური პროტეინის, Histidine Repeat Protein II (pHRP-II) და წყვილი მონოკლონური ანტისხეულების მიმართ პლაზმოდიუმის ლაქტატდეჰიდროგენაზას (pLDH) მიმართ, ცილა, რომელიც წარმოიქმნება ოთხი სახეობის მიერ, რომელიც წარმოქმნის პლაზმოდიუმის ოთხი სახეობის მიერ. დანარჩენი სამი პლაზმოდია.მისი შესრულება შესაძლებელია არატრენინგის ან მინიმალური კვალიფიკაციის მქონე პერსონალის მიერ, ლაბორატორიული აღჭურვილობის გარეშე.
პრინციპი
Pf/Pan მალარიის სწრაფი ტესტის ნაკრები არის გვერდითი ნაკადის ქრომატოგრაფიული იმუნოანალიზი.ტესტის ზოლის კომპონენტები შედგება: 1) შინდისფერი ფერის კონიუგატისაგან, რომელიც შეიცავს თაგვის ანტი-pHRP-II ანტისხეულს კოლოიდური ოქროთი (pHRP II-ოქროს კონიუგატები) და თაგვის ანტი-pLDH ანტისხეულები კოლოიდური ოქროთი (pLDH-ოქროს კონიუგატები).
2) ნიტროცელულოზის მემბრანის ზოლი, რომელიც შეიცავს ორ საცდელ ზოლს (Pan და Pv ზოლები) და საკონტროლო ზოლს (C ზოლი).პან ზოლი წინასწარ დაფარულია მონოკლონური ანტი-pLDH ანტისხეულით, რომლითაც შეიძლება გამოვლინდეს ინფექცია პლაზმოდიის ოთხი სახეობიდან რომელიმესთან, Pf ზოლი წინასწარ დაფარულია პოლიკლონური ანტი-pHRP-II ანტისხეულებით Pf ინფექციის გამოსავლენად, ხოლო C ზოლი დაფარულია თხის საწინააღმდეგო თაგვის IgG-ით.
ანალიზის დროს, სისხლის ნიმუშის ადექვატური მოცულობა ნაწილდება სატესტო კასეტის ნიმუშში (S), ბუფერულ ჭაბურღილს (B) ემატება ლიზისის ბუფერი.ბუფერი შეიცავს სარეცხი საშუალებას, რომელიც ასუფთავებს სისხლის წითელ უჯრედებს და ათავისუფლებს სხვადასხვა პლაზმოდიუმის ანტიგენებს, რომლებიც კაპილარული მოქმედებით მიგრირებენ კასეტაში მოთავსებულ ზოლზე.pHRP-II თუ წარმოდგენილია ნიმუშში, დაუკავშირდება pHRP II-ოქროს კონიუგატებს.შემდეგ იმუნოკომპლექსი იჭერს მემბრანას წინასწარ დაფარული ანტი-pHRPII ანტისხეულებით, რაც ქმნის შინდისფერი ფერის Pf ზოლს, რაც მიუთითებს Pf ტესტის დადებით შედეგზე.pLDH თუ წარმოდგენილია ნიმუშში, დაუკავშირდება pLDH ოქროს კონიუგატებს.შემდეგ იმუნოკომპლექსი იჭერს მემბრანას წინასწარ დაფარული ანტი pLDH ანტისხეულით, რაც ქმნის შინდისფერი ფერის პან ზოლს, რაც მიუთითებს პლაზმოდიუმის დადებითი ტესტის შედეგზე.პან ზოლის არარსებობის შემთხვევაში, დადებითი ტესტის შედეგი შეიძლება იყოს რეკომენდებული ნებისმიერი დანარჩენი სამი პლაზმოდისთვის.
ტესტის ზოლების (Pan და Pf) არარსებობა უარყოფით შედეგზე მიუთითებს.ტესტი შეიცავს შიდა კონტროლს (C ზოლს), რომელიც უნდა გამოავლინოს თხის საწინააღმდეგო თაგვის IgG/თაგვის IgG-ის იმუნოკომპლექსის შინდისფერი ზოლი (pHRP-II და pLDH-ოქროს კონიუგატები), მიუხედავად ფერის განვითარებისა რომელიმე ტესტის ზოლზე.წინააღმდეგ შემთხვევაში, ტესტის შედეგი არასწორია და ნიმუში ხელახლა უნდა შემოწმდეს სხვა მოწყობილობით.
